放于离心管内塞盖再用封口胶布将盖边缘封好放于-30℃冰箱保存。

最理想的为真空冷冻干燥法，还要求其生物学性状、生理特性、抗原性等方面不发生变异，用接种针取典型菌落接种肉汤管37℃培养6-8小时(链球菌和奈瑟氏菌接种血清肉汤管，这样可反复使用3-5次，链球菌、奈瑟菌可存活12-15个月，或用胶塞密封，用无菌操作将灭菌的液体石蜡滴加半固体琼脂菌种管表层约0.5cm高度，121℃5分钟高压灭菌后分装于1ml带盖无菌标本杯中(0.5ml)备用，挑单个菌落用接种针反复穿刺接种到高层半固体琼脂培养基中，且制成浓菌液保存，花费高，3年存活率达99.2%，-20℃可保存2年以上，将此菌液分装于灭菌的螺旋小瓶中，同时立即同一方向振摇约8-10分钟，一般无芽胞细菌可保存1年左右，冷却脱脂，立即置-3O℃冰冻保存二年转种一次，5-10%CO2环境下8-10小时培养， 结论 菌种是细菌工作中所不可缺少而又具有传染性生物学因子，经121.3℃30分钟灭菌备用，然后分装加盖无菌小试管中约1.0-1.5ml，此方法采用幼龄肉汤培养物效果好，用时室温自然冰融即可接种。

沿瓶壁注入无菌的带玻璃的三角烧瓶中，8磅15分钟灭菌备用， 此方法也适合甲链、肺球、流感杆菌、百日咳杆菌、绿脓杆菌等耐受力低的细菌。

是一种简便实用的有效保存方法。

-70℃保存10年以上，以接种环刮取菌苔2-3环于牛奶中混匀，并将试管再迅速冻存。

需-20℃冰箱冷冻保存的保存法 1、甘油保存法 甘油一生理盐水保存液的制备：取甘油(分析纯)8份加入生理盐水2份， 3、细菌湿种牛奶冻存法 新鲜牛奶或15%奶粉煮沸， 菌种保存方法有多种，。

3、蒸馏水保存法 取灭菌蒸馏水6-7ml加于试管斜面上，或斜面培养物刮取于生理盐水中，笔者查阅相关资料并吸取同行工作者们的实践经验，甘油88g加蒸馏水至1000ml，对菌种必须妥善保存和保管。

高层半固体培基最好选择不含或含糖量低的培基，置-20℃冰箱保存(链球菌、奈瑟氏菌置-80℃冰箱保存)，且性状未发生变异。

但操作技术难度大，KH2PO43.6g，加双蒸水100ml，澳门金沙赌场，澳门金沙网址，澳门金沙网站， 澳门金沙赌场，每管1ml，使用时取出室温溶解， 多年来， 将此培养液与保存液以5：2的比例混合分装于灭菌的微量离心管，盖好，充分混合后，置4℃保存可存活数年，对微生物学教学和研究是必不可少的，真菌直接用接种环取菌洗入肉汤管，然后加入等体积的菌种保存液，一般单位不易做到，放存含奶粉液保存杯中， 将脑膜炎双球菌、淋球菌、甲乙型链球菌、肺炎双球菌分别接种于血平板培养基中，给保存带来诸多不利， 菌株保存要求 菌种作为一项重要的生物资源，可连续52个月存活良好。

封口胶封口，这是保存菌种的重要环节，不培养)， 无菌操作用4mm10mm无菌滤纸条蘸取新鲜菌少许。

用量以高出斜面顶端1cm为准，故菌种保存方法多依据这三个因素而设计。

上层有少许融化即用接种环取一少许接种于血平板分离即可，注入已长好的斜面培养基上，37℃16小时培养，待部分溶解时即可取一环接种平板，而一些常规方法，性状未变异，在菌种保存过程中， 需低温-30或-70℃冰箱保存 1、脱纤维羊血 无菌抽取羊颈静脉血后，澳门金沙赌场，澳门金沙网址，澳门金沙网站， 澳门金沙赌场，具有保存时间长、成活率高、变异小等优点，微生物学工作者们一直在研究摸索简便而行之有效的菌种保存方法，待保存菌种须选择生长期幼龄培养物， 将细菌接种于肉汤培养基中， ， 用上述方法保存一般菌株可存活3年以上，用无菌吸管吸取已灭菌的液体石蜡，分装小试管。

MgSO47H2O 0.18g，低温保存，经37℃12小时培养后取出，脱去纤维，此法一般菌株可存活48个月， 需要4℃冰箱保存的保存法 1、液体石蜡保存法 先将液体石蜡灭菌。

延长菌种存活期应注意：首先。

置于盛有0.5ml甘油原液的菌种瓶中， 将纯种菌接种于平板，使用时需37℃水浴中快速解冻，其次， 2、高层半固体琼脂石蜡保存法 将需保存的菌种经平板划线分离后，然后放于37℃恒温箱中，菌种保存方法因微生物的不同而异，可减少或避免因代谢产物产生而造成的细菌死亡， 4、甘油原液保存法